Italiano

Fondamenti ed esempi applicativi delle principali metodologie immunometriche impiegate in Medicina di Laboratorio per la determinazione di parametri analitici in campioni biologici umani.

Principi e Tecniche di chimica clinica. Luigi Spandrio. PICCIN Editore (ISBN: 9788829915699).
Tecniche di biochimica clinica. Valerio Anna. CLEUP Editore (ISBN: 9788861292727).
Biochimica Clinica e Medicina di Laboratorio. Marcello Ciaccio, Giuseppe Lippi. EdiSES Editore (ISBN: 9788833190129).

L’insegnamento si propone di fornire le nozioni essenziali, nonché gli strumenti conoscitivi e applicativi, necessari per comprendere le principali metodologie immunometriche impiegate nella determinazione di parametri analitici in campioni biologici umani.

Per sostenere l’esame è necessario aver superato la seguente propedeuticità in ingresso: CHIMICA E BIOCHIMICA, FONDAMENTI PRELIMINARI ALLA PRATICA PROFESSIONARE.

Lezioni frontali con l’ausilio di strumenti multimediali e discussione degli argomenti trattati.

La verifica dell’apprendimento sarà effettuato mediante esame orale finale, con votazione in trentesimi. La media aritmetica dei moduli che compongono il corso integrato di BASI E APPLICAZIONI DELLE TECNICHE ANALITICHE determinerà invece il voto finale.

Per chiarimenti e problematiche inerenti agli argomenti dell'insegnamento, gli studenti possono rivolgersi direttamente al docente di riferimento, secondo le modalità indicate nella relativa pagina web.

• Il sistema antigene – anticorpo. Generalità, struttura e funzione di un anticorpo. Concetto di affinità e di avidità. Caratteristiche e proprietà degli antigeni e degli apteni. Cenni produttivi sugli anticorpi impiegati nelle metodiche immunometriche. Differenze, vantaggi e svantaggi tra anticorpi monoclonali e policlonali. La legge di azione di massa nel legame antigene – anticorpo. Classificazione delle metodologie immunometriche.
• Immunodiffusione in fase liquida, solida e radiale: metodi a confronto. Discussione di esempi applicativi in Medicina di Laboratorio.
• Principi analitici dell’immunocromatografia. Il Combo Test per la ricerca e la diagnosi di antigeni e/o anticorpi HIV1/2 specifici. Tamponi rapidi per la ricerca dell’antigene SARS-COV-2. Il dosaggio qualitativo della beta gonadotropina corionica (β-hCG).
• Immunochemiluminescenza diretta e indiretta. La cinetica delle reazioni di chemiluminescenza. Total Light Production (TLP), Peak Light Intensity (PLI) e Decay Portion Integration (DPI): confronto tra differenti modalità di rilevare la luce. Il chemiluminometro. Analisi quantitativa della β-hCG.
• Immuno-nefelometria e immuno-turbidimetria: il dosaggio della proteina C reattiva (CRP) e della transferrina carboidrato carente (CDT).
• I metodi immunoenzimatici. Traccianti enzimatici: proprietà e caratteristiche. Principio di funzionamento dei saggi competitivi. Metodi non-competitivi diretti ed indiretti. Rilevazione dell’immunocomplesso in fase omogenea ed eterogenea.
• Cenni di radiochimica: definizione di atomi, nuclidi, isotopi e radioisotopi. Unità di misura della radioattività. Principali isotopi utilizzati nelle metodiche radioimmunometriche. Disintegrazione beta del Trizio: la rilevazione tramite scintillazione liquida. Disintegrazione gamma dello iodio 125: la rilevazione tramite scintillazione solida. La marcatura degli antigeni con trizio e iodio 125. RIA e IRMA: saggi competitivo e non-competitivo. La separazione della componente legata da quella libera in fase liquida. Il dosaggio degli ormoni tiroidei.

Italian

Principles and Applications of the immunometric methods used in Laboratory Medicine to estimate clinical parameters in human biological samples.

Clinical Biochemistry. Nessar Ahmed. Oxford University Press (ISBN: 9780199674442).
Clinical Biochemistry & Metabolic Medicine. Martin Andrew Crook. Routledge (ISBN: 9781444144147).

This course has been conceived to provide essential knowledge on principles and applications of the immunological assays employed in Laboratory Medicine to determine some of the most common analytical parameters.

As expressly requested by the Degree Program Board in Biomedical Laboratory Techniques, to attend the course students have to pass the entry examination in “CHEMISTRY AND BIOCHEMISTRY, PRELIMINARY BASICS TO THE PROFESSIONAL PRACTICE”.

Lectures in Italian by using multimedia tools. Round table on selected syllabus-related topics will be defined together with the course students.

To pass the exam students need to prove an adequate knowledge of the whole syllabus by oral presentation.

Students can directly reach the designed Teacher for any clarification or further explanation. Additional contact details are indicated at the page of the Appointed Teaching Professor.

• The antigen-antibody system. Overview, structure and functions of the antibodies. Affinity and avidity. Concepts of antigen, carrier and hapten. Manufacturing antibodies for immunoassays. Monoclonal and polyclonal antibodies: differences, advantages and disadvantages. The law of mass action and the biochemical properties of antigen-antibody binding interactions. Classification of the immunometric methods.
• Liquid, solid and radial immunodiffusion. Qualitative and quantitative approaches in Laboratory Medicine.
• Principle and applications of the immunochromatography. The antigen/antibody combination assay for detecting HIV p24 antigen as well as HIV immunoglobulin M (IgM) and immunoglobulin G (IgG) antibodies. SARS-CoV-2 Antigen Rapid Test Kit. Qualitative analysis of beta human chorionic gonadotropin (β-hCG) as a screening test used to diagnose pregnancy.
• Direct and indirect chemiluminescent immunoassay. The kinetics of chemiluminescence reactions: Total Light Production (TLP), Peak Light Intensity (PLI) e Decay Portion Integration (DPI). Quantitative analysis of β-hCG as a confirmatory test to diagnose pregnancy.
• Immune-nephelometry and immune-turbidimetry: measurement of C-reactive protein (CRP) and Carboydrate-deficient Transferrin (CDT).
• Immunoenzymatic tests. Properties and features of the enzymatic tracers. Competitive and non-competitive assays. Heterogeneous and homogeneous separation of the immune complex involving enzymatic tracers.
• Radiochemistry: nuclides, isotopes and radioisotopes. Detecting radioactivity. Tritium and iodine-125 as examples of radioisotopes employed in radioimmunoassay. Liquid and solid scintillation for beta and gamma decay detection, respectively. Tritium and iodine-125 mediated labelling. RIA and IRMA. Heterogeneous and homogeneous separation of the immune complex involving isotopic tracers. Biochemical/thyroid hormone analyses.